臭氧对空气中的微生物有良好的杀灭作用，用于室内无人条件下空气的消毒。
一、 消毒方法
消毒时首先关闭窗户，开启臭氧发生器后操作人员立即离开消毒房间，并关门。消毒时间随臭氧浓度和杀灭微生物的种类而定，可按臭氧发生器使用说明书设定。消毒至预设定时间后，关闭臭氧发生器，待室内臭氧浓度降低至≤0.2mg/m3后（由厂家提供相应时间），人员才可进入。
二、 臭氧浓度和作用时间
臭氧用于空气消毒应达到一定浓度，但又不可太高，因太高的臭氧浓度会对室内某些物品有损害。一般来说，室内应75%≤RH≤95%，作用时间应≥30分钟，具体的臭氧浓度和作用时间应按使用说明书设定，或根据试验结果确定的剂量来进行消毒。
三、选择臭氧浓度和作用时间的原则
一是消毒目标微生物的种类，当针对芽胞、真菌、亲水病毒、结核杆菌等抵抗力较强的微生物时，臭氧浓度应高，作用时间应长；针对一般细菌繁殖体时，臭氧浓度可低一些。二是参考消毒环境的温度和相对湿度，温度和相对湿度均高时消毒效果好，可以适当降低臭氧浓度和减少作用时间。
四、注意事项
（1）采用臭氧消毒室内空气，室内必须无人；（2）消毒后必须在室内臭氧浓度降低至国家容许浓度(0.2mg/m3)以下，人员才可进入；（3）所用臭氧发生器必须能达到上述空气消毒的要求，并在说明书中提供详细的用法和臭氧产量。
五、 效果指标
1、 对人工污染微生物，在规定臭氧浓度和作用时间范围内，杀灭率应≥99.9％。
2、 对空气中的自然微生物，在规定的臭氧浓度和作用时间范围内，杀灭率应≥90％。
3、 用于医疗环境室内空气的消毒，其消毒效果必须达到“GB15982－1995医院消毒卫生标准”的要求，用于疫源地空气消毒，消毒后室内空气中不得检出病原菌，细菌数应达到医院Ⅲ类场所的卫生要求；用于室内空气的预防性卫生消毒，应使菌数减少到2500cfu/m3以下。
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